? ? ? ? 制藥行業(yè)一直是高效液相色譜法的重點應用領域，高效液相色譜法被廣泛運用于鑒別、雜質檢查、含量測定、體內分析等藥物分析測試與藥物質量分析方法的建立。比如用高效液相色譜法可以測定合成藥及其制劑的含量，消除藥物中的雜質、制劑中的附加劑及共存藥物的干擾。
? ? ? ? 《中華人民共和國藥典》（簡稱《中國藥典》）是藥品研制、生產、經(jīng)營、使用和監(jiān)督管理等均應遵循的法定依據(jù)。所有國家藥品標準應當符合中國藥典凡例及附錄的相關要求。2020版藥典對0512高效液相色譜法中的色譜條件參數(shù)的可調整項及可調整范圍做了詳細規(guī)定。
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? ? ? ? 固定相
? ? ? ? 不得改變填充劑的理化性質，如填充劑材質、表面修飾及鍵合相均需保持一致；從全多孔填料到表面多孔填料的改變，在滿足上述條件的前提下是被允許的。允許使用核殼型固定相色譜柱。
? ? ? ? 填料粒徑(dp)，柱長(L)
? ? ? ? 改變色譜柱填充劑粒徑和柱長后，L/dp值(或N值)應在原有數(shù)值的-25%至+50%范圍內，一定范圍內，允許調整色譜柱填料的粒徑和柱長。
? ? ? ? 恒譜生USHA、USHB和USHC手性系列液相色譜柱，具有高分離度、高選擇性、穩(wěn)定性和重復性優(yōu)異等優(yōu)點，適合各種化合物分離，色譜填料有有1.8、2、3、5、7、9、10μm等粒徑可供選擇，色譜柱柱長從30mm-250mm不等。恒譜生USHC手性系列液相色譜柱可應用大多數(shù)手性化合物的分離，優(yōu)異的分離度和耐久性，大幅降低分析到大量制備的初期成本。
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? ? ? ? 流速
? ? ? ? 如果改變色譜柱內徑及填充劑粒徑，可按下列公式計算流速：
? ? ? ? ?F2=F1x[(dc22xdp1)/( dc12xdp2)]，在此基礎上根據(jù)實際使用時
? ? ? ? 系統(tǒng)壓力和保留時間調整。其中，等度洗脫最大可在±50%的范圍內調整；梯度洗脫除按上述公式調整外，不得擴大調整范圍。一定范圍內，允許調整色譜條件中的流速。
? ? ? ? 進樣體積
? ? ? ? 調整以滿足系統(tǒng)適用性要求，如果色譜柱尺寸有改變，按下式計算進樣體積: Vinj2=V inj1x(L2xdc22)/(L1xdc12)，并根據(jù)靈敏度的需求進行調整。
? ? ? ? 梯度洗脫程序（等度洗脫不適用）
? ? ? ? te2=tcax (F/F2) >[(Lxd2)/(Lxdc1)],保持不同規(guī)格色譜柱的洗脫體積倍數(shù)相同，從而保證梯度變化相同，并需要考慮不同儀器系統(tǒng)體積的差異。允許根據(jù)色譜柱規(guī)格進行調整梯度洗脫程序，但要保證不同規(guī)格色譜柱的洗脫體積倍數(shù)相同，保證梯度變化相同。
? ? ? ? 流動相比例
? ? ? ? 最小比例的流動相組分可在相對值±30%或者絕對值±2%的范圍內進行調整(兩者之間選擇最大值)；最小比例流動相組分的比例需小于(100/n) %，n為流動相中組分的個數(shù)?？蛇m當調整流動相組分比例，以保證系統(tǒng)適用性復合要求，并且最終流動相洗脫強度不得弱于原梯度的洗脫強度。一定范圍內允許調整流動相比例。
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? ? ? ? 流動相緩沖液鹽濃度
? ? ? ? 可在±10%范圍內調整，一定范圍內，允許調整緩沖鹽濃度。
? ? ? ?除此之外，2020版藥典還規(guī)定：除另有規(guī)定外，通常取各品種項下的對照品溶液，連續(xù)進樣5次，其峰面積測量值（或內標比值或其校正因子）的相對標準偏差應不大于2.0 %。且該要求可視進樣溶液的濃度或體積、色譜峰響應和分析方法所能達到的精密水平等，對標準偏差的要求進行放緊或放寬，放寬或收緊的范圍以滿足品種項下檢測需要的精密度要求為準。新增了對定性分析（利用保留時間定性、利用光譜相似度定性、利用質譜檢測器提供的質譜信息定性）的詳細解釋。新增了多維液相（中心切割式二維色譜和全二維色譜）的測定法等等。
? ? ? ? 2020年版《中國藥典》自2020年12月30日起實施，它的頒布與實施將有利于整體提升我國藥品標準水平，進一步保障公眾用藥安全，推動醫(yī)藥產業(yè)結構調整，促進我國醫(yī)藥產品走向國際，實現(xiàn)由制藥大國向制藥強國的跨越。
發(fā)布于: 2021-06-04