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鬼峰去除柱芯

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一、?概述

鬼峰是液相色譜中最常出現(xiàn)的問題之一,在做液相色譜反相系統(tǒng)梯度分析時,有時會遇到儀器不進樣,也有出峰的情況;同樣的條件,有時出現(xiàn)異常色譜峰,這種峰神出鬼沒,變幻莫測,所以被稱為鬼峰。

?圖片1

鬼峰來源多種多樣,其主要來源可分為以下2個方面:

(1)流動相、樣品稀釋液、儀器或是容器中存在雜質(zhì),當梯度開始時由于有機相比例不高,洗脫能力不強,雜質(zhì)在色譜柱柱頭富集,隨著流動相比例變化,洗脫能力增強,富集的雜質(zhì)被洗脫,從而形成鬼峰。

(2)流動相脫氣不完全,殘留氣泡??諝庠谟袡C相和水中的溶解度不同,當水和有機相混合時,氣泡就產(chǎn)生了。

鬼峰的危害:

1、污染儀器

2、對樣品成分誤判斷

3、與目標峰重疊,影響分離度

4、增加工作量要做更多的驗證工作去判定這個物質(zhì)是否是目標物質(zhì)

反相色譜梯度分析時,使用恒譜生鬼峰捕集柱能夠去除溶劑包括有機溶劑中的雜質(zhì),對弱極性和非極性的有機雜質(zhì)有強烈吸附,有效的消除污染物,減少鬼峰出現(xiàn)的幾率,延長色譜柱和儀器的壽命。

二、?鬼峰搜集去除柱的安裝

鬼峰捕集去除柱保存在純甲醇中,使用前采用純甲醇1ml/min流速沖洗20min(注意:不要連接色譜柱和檢測器進行沖洗),沖洗好后卸下小柱,按照示意圖安裝位置,連接到混合器與進樣器之間。(安裝時注意進出方向)

圖片2

下面實例表明,將恒譜生鬼峰去除小柱安裝在混合器之后可以有效捕集流動相引進的雜質(zhì)。

色譜條件:

色譜柱:USHA-?C18 4.6*250mm 5um

流速:1.0ml/min?????進樣量:20ul????柱溫:40度????檢測波長:210nm

樣品:高純水????流動相A:高純水????流動相B:乙腈

運行梯度:

時間(min)

流動相A(%)

流動相B(%)

0

90

10

20

10

90

30

10

90

使用前使用前

使用后使用后

 

 

 

 

鬼峰來源:

1.儀器中的雜質(zhì)

2.樣品中的雜質(zhì)

3.流動相中的雜質(zhì)

4.進樣口稀釋液與流動相極性/PH相差太大

5.流動相殘留氣泡

6.儀器系統(tǒng)時間較久

 

其中主要來源于流動相和管路,如:有機相中污染物,水相中污染物,緩沖鹽,流動相瓶和混合過程產(chǎn)生等等。

 

 

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